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To clarify the evolutionary relationships among β -hsd genes, a phylogenetic tree was constructed with amino acid sequences of 96 β-HSDs collected from grouper, human, zebrafish, stickleback, and tilapia. Both maximum likelihood (ML, Figure 3) and Neighboring-Joining method (NJ, Supplementary Figure S2) strategies were devoted to construct phylogenetic trees based on the alignment of their amino acid sequences. The trees produced by these two methods differed only in a small number of branches, indicating that the evolutionary tree is credible. Figure 4. Clustering of the expression profiles of 19 grouper β -hsd genes during sex reversal. Genes were clustered according to phylogenetic relationships in expression profiles.
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